长沙无菌室工程洁净厂房建设 施工方案

无菌室建造条件
1、无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染。
2、严防一切器材和培养基污染，已污染者应停止使用。
3、无菌室应备有工作浓度的液，如5%的甲酚溶液，70%的酒精，0.1%的灭溶液等等。
4、无菌室应定期用适宜的灭溶液清洁，以保证无菌室的洁净度符合要求。
5、需要带入无菌室使用的仪器，器械，平皿等一切物品，均应包扎严密，并应经过适宜的方法。
6、无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照30分钟以上，并且同时打开**净台进行吹风。操作完毕，应及时清理无菌室，再用紫外灯辐照20分钟。
7、供试品在检查前，应保持外包装完整，不得开启，以防污染。检查前，用70%的酒精棉球外表面。
8、每次操作过程中，均应做阴性对照，以检查无菌操作的可靠性。
9、吸取菌液时，必须用吸耳球吸取，切勿直接用口接触吸管。
10、接种针每次使用前后，必须通过火焰灼烧，待冷却后，方可接种培养物。
11、带有菌液的吸管，培养皿等器皿应浸泡在盛有5%来溶液的桶内，后取出冲洗。
12、如有菌液洒在桌上或地上，应立即用5%石碳酸溶液或3%的来倾覆在被污染处至少30分钟，再做处理。工作衣帽等受到菌液污染时，应立即脱去，高压蒸汽后洗涤。
13、凡带有活菌的物品，必须经后，才能在水龙头下冲洗，严禁污染下水道。
14、无菌室应每月检查菌落数。在**净工作台开启的状态下，取内径90mm的无菌培养皿若干，无菌操作分别注入融化并冷却至约45℃的营养琼脂培养基约15ml，放至凝固后，倒置于30～35℃培养箱培养48小时，无菌后，取平板3～5个，分别放置工作位置的左中右等处，开盖暴露30分钟后，倒置于30～35℃培养箱培养48小时，取出检查。100级洁净区平板杂菌数平均不得**过1个菌落，10000级洁净室平均不得**过3个菌落。如**过限度，应对无菌室进行，直至重复检查合乎要求为止。
无菌室内设备和用具
（1）无菌室内的工作台，不论是什么材质、用途的，都要求表面光滑和台面水平。
（2）在内室和外室各安装一个紫外灯（多为30W）。内室的紫外线灯应安装在经常工作的座位正上方，离地面2m，外室的紫外线灯可安装在外室。
（3）外室应有的工作服、鞋、帽、口罩、盛有来苏儿水的瓷盆和毛巾、手持喷雾器和5%石炭酸溶液等。
（4）内室应有酒精灯、常用接种工具、不锈钢制的刀、剪、镊子、70%的酒精棉球、工业酒精、载玻璃片、特种蜡笔、记录本、铅笔、标签纸、胶水、废物筐等。

无菌室应根据既经济又科学的原则来设置。其基本要求有以下几点：
1、无菌室应有内、外两间，内间是无菌室，外间是缓冲室。房间容积不宜过大，以便于空气。内间面积2×2.5＝5m2，外间面积1×2＝2m2，高以2.5m以下为宜，都应有天花板。
2、内间应当设拉门，以减少空气的波动，门应设在离工作台远的位置上；外间的门好也用拉门，要设在距内间远的位置上。
3、在分隔内间与外间的墙壁或“隔扇”上，应开一个小窗，作接种过程中必要的内外传递物品的通道，以减少人员进出内间的次数，降低污染程度。小窗宽60cm、高40cm、厚30cm，内外都挂对拉的窗扇。
4、无菌室容积小而严密，使用一段时间后，室内温度很高，故应设置通气窗。通气窗应设在内室进门处的顶棚上（即离工作台远的位置），好为双层结构，外层为百叶窗，内层可用抽板式窗扇。通气窗可在内室使用后、前开启，以流通空气。有条件可安装恒温恒湿机。

无菌室的消菌
（1）薰蒸：这是无菌室的措施。无菌室使用了较长时间，污染比较严重时，应进行薰蒸。
（2）喷雾：在每次使用无菌室前进行。喷雾可促使空气中微粒及微生物沉降，防止桌面、地面上的微尘飞场，并有作用。可用5%石炭酸喷雾。
（3）紫外线照射：在每次使用无菌室前进行。紫外线有较好的效果。通常应开启紫外线灯照射30～60min。

无菌室工作规程
（1）无菌室。每次使用前开启紫外线灯照射30min以上，或在使用前30min，对内外室用5%石炭酸喷雾。
（2）用肥皂洗手后，把所需器材搬入外室；在外室换上已的工作服、工作帽和工作鞋，戴好口罩，然后用2%煤酚皂液将手浸洗2分钟。
（3）将各种需用物品搬进内室清点、位，用5%石炭酸在工作台面上方和操作员站位空间喷雾，返回外室，5～10min后再进内室工作。
（4）接种操作前，用70%酒精棉球擦手；进行无菌操作时，动作要轻缓，尽量减少空气波动和地面扬尘。
（5）工作中应注意。如遇棉塞着火，用手紧握或用湿布包裹熄灭，切勿用嘴吹，以免扩大燃烧；如遇有菌培养物洒落或打碎有菌容器时，应用浸润5%石炭酸的抹布包裹后，并用浸润5%石炭酸的抹布擦拭台面或地面，用酒精棉球擦手后再继续操作。
（6）工作结束，立即将台面收拾干净，将不应在无菌室存放的物品和废弃物全部拿出无菌室后，对无菌室用5%石炭酸喷雾，或开紫外线灯照射30min。
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